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综合馆
不同类型连接肽对β-甘露聚糖酶AuMan5A酶学性质的影响
  • 摘要

    以柔性肽F(GGGGS)3或刚性肽R(EAAAK)3为连接肽,将海栖热胞菌27家族碳水化合物结合域(CBM27)与宇佐美曲霉5家族β-甘露聚糖酶(AuMan5A)的C末端融合,探讨不同类型连接肽对AuMan5A酶学性质的影响,获取具有优良酶学性质的融合酶.采用重叠PCR技术扩增融合酶基因Auman5A-F-cbm27和Auman5A-R-cbm27,分别将Auman5A和融合酶基因在毕赤酵母GS115中进行表达,分析表达产物reAuMan5A、reAuMan5A-F-C和reAuMan5A-R-C的酶学性质.结果表明:该3种β-甘露聚糖酶对角豆胶的Km值分别为1.7、1.9和0.9 mg/mL.3种酶的最适温度Topt分别为70、65和70℃;reAuMan5A-F-C和reAuMan5A-R-C在70℃的半衰期t170/2分别为36 min和124 min,较reAuMan5A的(t170/2=9 min)延长了3倍和12.8倍.reAuMan5A-R-C具有底物亲和力强、热稳定性高和pH稳定范围广等特点,在食品、饲料、医药和能源等领域有着巨大的应用潜力.

  • 作者

    王春娟  唐诗涵  邬敏辰  董运海  杭宜岭  李剑芳  WANG Chunjuan  TANG Shihan  WU Minchen  DONG Yunhai  HANGYiling  LI Jianfang 

  • 作者单位

    江南大学食品学院,江苏无锡,214122/江南大学无锡医学院,江苏无锡,214122

  • 刊期

    2017年9期 ISTIC PKU

  • 关键词

    连接肽  β-甘露聚糖酶  融合酶  底物亲和力  热稳定性 

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3.227.240.31