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综合馆
酒用酸性脲酶的纯化及其N端序列的测定
  • 摘要

    采用乙醇分级沉淀、Superdex200凝胶过滤、Mono Q离子交换对Enterobactria sp R-SYB082产酒用酸性脲酶进行了纯化.SDS-PAGE电泳结果表明,该酶已达到电泳纯,纯化倍数为21.1,酶活回收42%.Superdex200凝胶过滤测定其全酶相对分子质量约为430 000,SDS-PAGE电泳测定其亚基相对分子质量约为72 000,表明该酶为同源六聚体,并利用Edman降解法测定了蛋白质N端序列的8个氨基酸残基序列:S-F-K-M-D-R-K-Q.酶反应的最适pH为4.5,最适温度为35℃.以尿素为底物时,该酶表现Km及Vmax分别为19.5μmol/L和0.87μmol/min.Na+、Mn2+对酶活有一定的激活作用,Ca2+、Zn2+对酶活有一定的抑制作用,酒石酸、琥珀酸对酶活有一定的激活作用,草酸、乙酸对酶活有一定的抑制作用.

  • 作者

    杨鲁强  王松华  田亚平  徐岩  赵光鳌  YANG Lu-qiang  WANG Song-hua  TIAN Ya-ping  XU Yan  ZHAO Guang-ao 

  • 作者单位

    江南大学工业生物技术教育部重点实验室,江苏,无锡,214122

  • 刊期

    2008年6期 ISTIC PKU

  • 关键词

    酸性脲酶  尿素  肠杆菌属细菌  纯化  N端序列 

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34.226.244.70