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综合馆
基于CRISPR/Cas9技术构建BHV-1gE缺失株及其免疫生物学特性初步鉴定
  • 摘要

    牛(Bos taurus)疱疹病毒I型(Bovine herpes virus type I,BHV-1)可引发牛传染性鼻气管炎(infectious bovine rhinotracheitis,IBR),对养牛业造成巨大经济损失.基因缺失疫苗的广泛使用可有效减少BHV-1感染.为了更高效地构建基因缺失疫苗,本研究应用CRISPR/Cas9基因编辑与同源重组技术,构建带有增强型绿色荧光蛋白基因(enhanced green fluorescent protein,EGFP)标记并缺失糖蛋白E基因(glycoprotein E,gE)的重组BHV-1病毒,命名为BHV-1 gE-/EGFP+.随后通过特异性的小向导RNA (smallguide RNA,sgRNA)敲除BHV-1 gE-/EGFP+病毒基因组中的EGFP基因,该gE基因缺失株命名为BHV-1ΔgE.体外生物学特性分析显示,BHV-1 AgE与亲本BHV-1具有相似的生长特性和噬斑形态.动物免疫实验结果显示,gE基因缺失没有改变BHV-1的免疫原性,BHV-1 gE缺失株可作为新型重组IBR疫苗的候选毒株.本研究首次利用CRISPR/Cas9系统对BHV-1 gE基因进行了缺失编辑,提供了一种高效的BHV-1基因缺失毒株的构建方法,为IBR基因缺失疫苗研制提供了实验依据.

  • 作者

    穆艳霞  张金玲  刘春羽  刘海瑞  温永俊  李光鹏  杨洋  MU Yan-Xia  ZHANG Jin-Ling  LIU Chun-Yu  LIU Hai-Rui  WEN Yong-Jun  LI Guang-Peng  YANG Yang 

  • 作者单位

    内蒙古大学省部共建草原家畜生殖调控与繁育国家重点实验室,呼和浩特,010070/内蒙古农业大学兽医学院,呼和浩特,010070

  • 刊期

    2018年12期 ISTIC PKU

  • 关键词

    牛疱疹病毒Ⅰ型(BHV-1)  CRISPR/Cas9  同源重组  糖蛋白E基因(gE) 

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3.233.239.102