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综合馆
海洋放线菌S.areniocola CNS-205腺苷化结构域基因的克隆、表达和纯化
  • 摘要

    海洋放线菌S.arenicola CNS-205是首次报道的专属海洋性放线菌属Salinispora的代表菌株之一.选取海洋放线菌S.arenicola CNS-205非核糖体多肽合成酶氨基酸腺苷化结构域基因sare0357,对其进行生物信息学分析后进行原核重组质粒的构建和表达及蛋白纯化.分别构建了pET 28a-sare0357和pGEX KG sare0357重组质粒,并转化E.coli BL21 (DE3)进行不同诱导条件的诱导表达,sare0357基因均以包涵体的形式表达.收集Sare0357重组蛋白包涵体,选取6 mol/L的盐酸胍对其进行变性并将变性后的重组蛋白进行镍柱纯化.得到了可溶性的Sare0357融合蛋白.

  • 作者

    陆胜利  祁超  LU Shengli  QI Chao 

  • 作者单位

    安庆医药高等专科学校 药学系,安徽安庆,246052/华中师范大学 生命科学学院,武汉,430079

  • 刊期

    2014年6期 ISTIC PKU

  • 关键词

    海洋放线菌  非核糖体多肽合成酶  腺苷化结构域  marine actinomycete  nonribosomal peptide synthetases  adenylation domain 

参考文献
  • [1] Penn K;Jenkins C;Nett M. Genomic islands link secondary metabolism to functional adaptation in marine Actinobacteria. ISME J, 2009,10
  • [2] Schultz A W;Oh D C;Carney J R. Biosynthesis and structures of cyclomarins and cyclomarazines,prenylated cyclic peptides of marine actinobacterial origin. J Am Chem Soc, 2008,13
  • [3] Lee S H;Carpenter J F;Chang B S. Effects of solutes on solubilization and refolding of proteins from inclusion bodies with high hydrostatic pressure. Protein Science, 2006,02
  • [4] Tsumoto K;Ejima D;Kumagai I. Practical considerations in refolding proteins from inclusion bodies. Protein Expression and Purification, 2003,01
  • [5] Patra A K;Mukhopadhyay R;Mukhija R. Optimization of inclusion body solubilization and renaturation of recombinant human growth hormone from escherichia coli. Protein Expression and Purification, 2000,02
  • [6] 萨姆布鲁克J;拉塞尔DW;黄培堂. 分子克隆实验指南. 北京:科学出版社, 1998
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3.235.66.217