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综合馆
HproTα/hIL-2融合蛋白真核载体的构建及鉴定
  • 摘要

    利用基因重组技术构建了含信号肽的人源胸腺素α原和白介素2(proTα/IL-2)融合基因的真核表达载体pVAX-PI.用脂质体转染试剂转染COS-7细胞,转染后24、48、72、96 h采用ELISA法检测细胞培养上清中IL-2的表达情况,分别用CTLL-2依赖细胞株/MTT法和脾细胞增殖实验测定融合蛋白IL-2和proTα活性,采用ECL western blotting分析和鉴定目的蛋白的相对分子质量大小.结果表明,转染上清在31 kDa处有特异性阳性反应条带,质粒在转染COS-7细胞后不同时间均可进行分泌表达,且于转染后48 h目的蛋白的表达量达峰值.细胞转染上清中的IL-2活性可达58 IU/mL,proTa具有促进小鼠脾脏细胞增殖的作用,可作为基因治疗药物的开发之用.

  • 作者

    周飞燕  黄明  韦剑  丘力功  卢柳燕  孙希海  ZHOU Fei-yan  HUANG Ming  WEI Jian  QIU Li-gong  LU Liu-yan  SUN Xi-hai 

  • 作者单位

    广西师范大学,生命科学学院,广西,桂林,541004/广州拜迪生物医药有限公司,广东,广州,511495

  • 刊期

    2008年2期 ISTIC PKU

  • 关键词

    胸腺素α原  白介素2  融合蛋白  转染 

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3.233.239.102