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综合馆
脑提取物中Calcineurin活性测定方法的优化
  • 摘要

    以32P标记的RII多肽为底物,研究了在脑提取物中钙调神经磷酸酶(CN)活性的测定过程中,CN活性依赖的一些离子或蛋白及测活条件对CN活性的影响,对脑提取物中CN活性的测定方法进行了优化.实验表明,脑提取物中的ca2+足以激活CN活性,在测活反应体系中不需再补加Ca2+,但补加钙调素(CaM)是必须的,其在反应体系中的最适浓度是0.13 μmol·L-1;抑制反应体系中的CN活性的最适EGTA浓度为0.16 mmol·L-1;对于脑提取物中的CN活性,Mn2+是比Mg2+更有效的激活剂,其最适终浓度为0.5 mml·L-1;脑匀浆过程中蛋白酶抑制剂的加入有助于在90min内保持CN的活性.

  • 作者

    于大禹  骆静  张文  马杰  魏群  Yu Dayu  Luo Jing  Zhang Wen  Ma Jie  Wei Qun 

  • 作者单位

    北京师范大学生命科学学院生物化学与分子生物学系,100875,北京

  • 刊期

    2007年1期 ISTIC PKU

  • 关键词

    钙调神经磷酸酶  脑提取物  测活  RⅡ多肽 

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3.234.245.125