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HPLC和MALDI-TOF-MS法分析重组人钙调磷酸酶B亚基的纯度和肽图谱
  • 摘要

    用反相高效液相色谱(RP-HPLC)法对重组人钙调磷酸酶B亚基(rhCNB)的纯度和肽图谱进行了测定,以比较不同批次产品的纯度及其一级结构的一致性,对其进行质量控制.并用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)法进行验证.结果表明,运用梯度洗脱RP-HPLC法能对样品进行纯度检查和肽图谱分析,测得3批样品纯度均达到98%以上,肽图谱能达到批间一致.同时用MALDI-TOF-MS法测定,纯度结果二者相符,质谱肽图经计算机辅助分析,确证rhCNB一级结构与天然CNB一致.证明该方法灵敏、准确、可靠.

  • 作者

    高锦  王艳丽  魏群 

  • 作者单位

    北京师范大学生化与分子生物学系,100875,北京;沈阳军区联勤部药品仪器检验所,110026,沈阳/北京师范大学生化与分子生物学系,100875,北京/北京师范大学生化与分子生物学系,100875,北京;北京市植物资源研究开发重点实验室,100094,北京

  • 刊期

    2004年1期 ISTIC PKU

  • 关键词

    重组人钙调磷酸酶B亚基(rhCNB)  高效液相色谱法  基质辅肋激光解吸电离飞行时间质谱法  纯度  肽图谱 

参考文献
  • [1] Wei Qun;Lian Mulan;Jing Fengzhi. Studies of calcineurin B subunit from genetic engineering for use in medicine. Drug Development Research, 2002
  • [2] Liu J;Jr Farmer J D;Lane W S. Calcineurin is a common target of cyclophlin-chclosporin A and FKBP-FK506 complexes. CELL, 1991
  • [3] Geiffith J P;Kim J L;Kim E E. FKBP12 and CyP are small, ubiquitous cytosolic proteins that function enzymatically as cis-trans peptidyl prolyl isomerases. Cell, 1995
  • [4] Alice Haddy;Selene K;Swanson-H. Inhibition of calcineurin by cyclosporin A-cyclosphilin requires calcineurin B. FEBS Journal, 1992,01
  • [5] Timmerman L A;Clipstone N A. Rapid shuttling of NF-AT in discrimination of Ca2+ signals and immunosuppression. Nature, 1996
  • [6] Wang H G;Pathan N;Ethell I M. Ca2+-induced apoptosis through calcineurin dephosphorylation of BHD. Science, 1999
  • [7] Srivastava R K;Sasaki C Y;Hardwick J M. Bcl-2-mediated drug resistance: inhibition of apoptosis by blocking nuclear factor of activated T lymphocytes(NFAT)-induced fas ligand transcription. Journal of Experimental Medicine, 1999
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3.234.208.66